APPLICATION: 3-D cell culture, hydrogel injections, filling of microchannels, generation of soft to very stiff gels.
QUANTITY: Allows formation of up to 2 ml 3-D Life Hydrogel depending on the stiffness of the gel.
| Material | Quantity | Concentration of reactive groups | |
|---|---|---|---|
| SG-Dextran | 170 µl | 30 mmol/L | MSDS |
| CD-Link, lyophilized | 200 µl* | 20 mmol/L* | MSDS |
| 10x CB (pH 7.2) | 200 µl | n.a. | MSDS |
| Water | 2 x 1500 µl | n.a | MSDS |
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*Volume/concentration after reconstitution of lyophilisate. |
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El Kit de Hidrogel 3-D Life Dextran-CD Hydrogel SG proporciona reactivos para la preparación de hidrogeles compatibles con las células y con gelificación lenta. Sus principales componentes son SG-Dextrano y el entrecruzador CD-Link. Cuando se combinan ambos reactivos, los grupos tiol en CD-Link forman enlaces tioéter estables con grupos tiol-reactivos en SG-Dextrano, lo que resulta en la formación del gel. Los componentes se mezclan a pH fisiológico (pH 7.2) para una compatibilidad celular óptima. La cinética de gelificación lenta permite suficiente tiempo para manipular convenientemente la solución antes del inicio de la formación del gel.
CD-Link está compuesto por polietilenglicol y un péptido cleavable por metaloproteasas de matriz (MMP) (Pro-Leu-Gly-Leu-Trp-Ala). El péptido cleavable por MMP está diseñado para una amplia gama de escisión de MMP, incluyendo MMP1, MMP3, MMP7 y MMP9 [1]. Permite que las células se propaguen y migren dentro del hidrogel si expresan las MMP indicadas. En la mayoría de los casos, la propagación y migración de células también requiere la presencia de péptidos de adhesión.
Antes del paso de entrecruzamiento, los péptidos de adhesión celular (por ejemplo, el Péptido RGD 3-D Life, Cat. No. 09-P-001) se pueden unir covalentemente a una porción de los grupos SH-reactivos en SG-Dextrano para proporcionar una matriz adhesiva celular.
Los hidrogeles SG-Dextran se pueden disolver mediante la adición de dextranasa (Dextranasa 3-D Life, Cat. No. D10-1), lo que permite la recuperación de células fijadas químicamente o vivas para análisis post-cultivo (por ejemplo, RT-PCR) o para posterior cultivo.
Para obtener instrucciones, consulte el Protocolo General GP-2 "Preparación de Hidrogeles de Gelificación Lenta 3-D Life" y la Guía de Usuario de Hidrogeles 3-D Life.
APPLICATION: 3-D cell culture, hydrogel injections, filling of microchannels, generation of soft to very stiff gels.
QUANTITY: Allows formation of up to 2 ml 3-D Life Hydrogel depending on the stiffness of the gel.
