Poly(I:C) (LMW) de 25 mg Ver: Invivogen

Poliinosina-ácido policitidílico de bajo peso molecular – agonista de TLR3

El ácido poliinosínico-policitidílico (es decir, poli(I:C)) es un análogo sintético del ARN de doble cadena (ARNds), un patrón molecular asociado con la infección viral. Poly(I:C) LMW (bajo peso molecular) de InvivoGen se compone de hebras cortas de homopolímero de poli(I) de inosina recocidas con hebras de homopolímero de poli(C) de citidina. El tamaño medio de Poly(I:C) LMW es de 0,2 kb a 1 kb . Poly(I:C) LMW se valida funcionalmente para la potencia de TLR3 utilizando células HEK-Blue™ TLR3 y la ausencia de contaminantes (por ejemplo, lipoproteínas y endotoxinas) se confirma utilizando ensayos celulares TLR2 y TLR4, respectivamente.

Reconocimiento y señalización poli(I:C)

Estructura general de Poly(I:C) y vía de señalización

Estructura general de Poly(I:C) y vía de señalización

Poly(I:C) es estructuralmente similar al dsRNA, presente en algunos virus y, por lo tanto, se usa comúnmente para modelar las acciones del dsRNA extracelular.

Al unirse a sus receptores, el poli(I:C) puede activar selectivamente numerosas vías de señalización según las condiciones. Poly(I:C) es reconocido por el receptor endosomal Toll-like 3 (TLR3) [1, 2]. Tras el reconocimiento, TLR3 activa el factor regulador de interferón del factor de transcripción 3 (IRF3), a través del adaptador que contiene el dominio del receptor Toll-IL-1 (TIR) ​​de la proteína adaptadora (TRIF, también conocido como TICAM-1) [3]. La activación de IRF3 conduce a la producción de IFN de tipo I (p. ej., IFN-β). Además, el reconocimiento de poli(I:C) puede conducir al reclutamiento del factor 6 asociado al receptor de TNF (TRAF6) o la proteína 1 que interactúa con el receptor (RIP1), con la subsiguiente activación de los factores de transcripción NF-κB y AP-1. [4]. La activación de estas vías desencadena la producción de citocinas y quimiocinas inflamatorias como TNF-α, IL-6 y CXCL10. Es más,

Debido a su capacidad para inducir la señalización a través de múltiples vías inflamatorias, se sabe que el poli(I:C) aumenta la inmunogenicidad de las vacunas, especialmente en formulaciones que se dirigen a las células dendríticas. Se ha demostrado que las cualidades superiores de poli(I:C) como adyuvante de vacunas pueden deberse a la sinergia entre la activación de TLR3 y MDA-5 [6]. 

Características clave de Poly(I:C) LMW:

Activador de TLR3

Funcionalmente validado

El poli(I:C) (LMW) marcado con rodamina también está disponible.

Investigación relacionada con COVID-19

Los interferones tipo I (IFNα/β) son las citoquinas antivirales prototípicas. Los inductores de estas citocinas, como el agonista sintético dsRNA TLR3, Poly (I:C), se pueden utilizar para estudiar la respuesta inmunitaria innata al SARS-CoV-2.

Referencias:

1. Alexopoulou L. et al. , 2001. Reconocimiento de ARN de doble cadena y activación de NFkappaB por el receptor tipo Toll 3. Nature, 413(6857):732-8.

2. Matsumoto M. et al., 2002. Establecimiento de un anticuerpo monoclonal contra el receptor 3 similar a Toll humano que bloquea la señalización mediada por ARN de doble cadena. BBRC, 293(5):1364-9.

3. Yamamoto M. et al. , 2003. Papel del adaptador TRIF en la vía de señalización del receptor tipo peaje independiente de MyD88. Science 301: 640.

4. Kawai T & Akira S., 2008. Señalización del receptor tipo Toll y del receptor tipo RIG-I. Ann NY Acad Sci. 1143:1-20. Revisar.

5. Kato H. et al., 2006.Papeles diferenciales de las helicasas MDA5 y RIG-I en el reconocimiento de virus de ARN. Naturaleza. 441 (7089): 101-5.

6. van den Boorn, JG y col . 2012. Adyuvantes de ácido nucleico: hacia una vacuna educada. Adv Immunol 114, 1-32.

Especificaciones

Número CAS: 31852-29-6

Concentración de trabajo: 30 ng - 10 μg/ml

Solubilidad: 20 mg/ml en agua fisiológica (NaCl 0,9%)

Control de calidad:

Espectro de absorbancia

La actividad de TLR3 se ha verificado utilizando células HEK-Blue™ TLR3

La ausencia de contaminación bacteriana (p. ej., lipoproteínas y endotoxinas) se ha confirmado utilizando células HEK-Blue™ TLR2 y HEK‑Blue™ TLR4 .

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Contenido

Poly(I:C) LMW se suministra liofilizado y con agua fisiológica estéril libre de endotoxinas (NaCl 0,9%).

Está disponible en dos cantidades:

25 mg (#tlrl-picw) con 10 ml de agua fisiológica estéril libre de endotoxinas

250 mg (#tlrl-picw-250) con 2 x 25ml de agua fisiológica estéril libre de endotoxinas

Poly(I:C) LMW se envía a temperatura ambiente

Al recibirlo almacenar a 4°C. Tras la resuspensión, prepare alícuotas y guárdelas a -20 °C para almacenamiento a largo plazo. Almacenar a 4°C para almacenamiento a corto plazo.

El producto liofilizado es estable 1 año a 4°C cuando se almacena adecuadamente.

El producto resuspendido es estable 1 mes a 4°C y 1 año a -20°C.

Alerta-Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación.