El ácido poliinosínico-policitidílico (es decir, poli(I:C)) es un análogo sintético del ARN de doble cadena (ARNds), un patrón molecular asociado con infecciones virales. El poli(I:C) HMW (alto peso molecular) de InvivoGen se compone de hebras largas de homopolímero de poli(I) de inosina recocidas a hebras de homopolímero de poli(C) de citidina. El tamaño medio de Poly(I:C) HMW es de 1,5 kb a 8 kb . Poly(I:C) HMW se valida funcionalmente para la potencia de TLR3 usando HEK-Blue™ TLR3 Cells y la ausencia de contaminantes (por ejemplo, lipoproteínas y endotoxinas) se confirma usando ensayos celulares TLR2 y TLR4, respectivamente.
Estructura general de Poly(I:C) y vía de señalización
Estructura general de Poly(I:C) y vía de señalización
Reconocimiento y señalización poli(I:C)
Poly(I:C) es estructuralmente similar al dsRNA, presente en algunos virus y, por lo tanto, se usa comúnmente para modelar las acciones del dsRNA extracelular.
Al unirse a sus receptores, el poli(I:C) puede activar selectivamente numerosas vías de señalización según las condiciones. Poly(I:C) es reconocido por el receptor endosomal Toll-like 3 (TLR3) [1, 2]. Tras el reconocimiento, TLR3 activa el factor de transcripción factor regulador de interferón 3 (IRF3), a través del adaptador que contiene el dominio del receptor Toll-IL-1 (TIR) de la proteína adaptadora (TRIF, también conocido como TICAM-1) [3]. La activación de IRF3 conduce a la producción de IFN de tipo I (p. ej., IFN-β). Además, el reconocimiento de poli(I:C) puede conducir al reclutamiento del factor 6 asociado al receptor de TNF (TRAF6) o la proteína 1 que interactúa con el receptor (RIP1), con la subsiguiente activación de los factores de transcripción NF-κB y AP-1. [4]. La activación de estas vías desencadena la producción de citocinas y quimiocinas inflamatorias como TNF-α, IL-6 y CXCL10. Es más,
Debido a su capacidad para inducir la señalización a través de múltiples vías inflamatorias, se sabe que el poli(I:C) aumenta la inmunogenicidad de las vacunas, especialmente en formulaciones que se dirigen a las células dendríticas. Se ha demostrado que las cualidades superiores de poli(I:C) como adyuvante de vacunas pueden deberse a la sinergia entre la activación de TLR3 y MDA-5 [6].
Características clave de Poly(I:C) HMW:
Potente activador de TLR3
Funcionalmente validado
Altamente citado en la literatura tanto para ensayos in vitro como in vivo
También están disponibles formularios de HMW VacciGrade™ Poly(I:C) estériles preetiquetados y garantizados
Investigación relacionada con COVID-19
Los interferones tipo I (IFNα/β) son las citoquinas antivirales prototípicas. Los inductores de estas citoquinas, como el agonista sintético dsRNA TLR3, Poly (I:C), se pueden usar para estudiar la respuesta inmune innata al SARS-CoV-2
Referencias:
1. Alexopoulou L. et al. , 2001. Reconocimiento de ARN de doble cadena y activación de NFkappaB por el receptor tipo Toll 3. Nature, 413(6857):732-8.
2. Matsumoto M. et al., 2002. Establecimiento de un anticuerpo monoclonal contra el receptor 3 similar a Toll humano que bloquea la señalización mediada por ARN de doble cadena. BBRC, 293(5):1364-9.
3. Yamamoto M. et al. , 2003. Papel del adaptador TRIF en la vía de señalización del receptor tipo peaje independiente de MyD88. Science 301: 640.
4. Kawai T & Akira S., 2008. Señalización del receptor tipo Toll y del receptor tipo RIG-I. Ann NY Acad Sci. 1143:1-20. Revisar.
5. Kato H. et al., 2006.Papeles diferenciales de las helicasas MDA5 y RIG-I en el reconocimiento de virus de ARN. Naturaleza. 441 (7089): 101-5.
6. van den Boorn, JG y col . 2012. Adyuvantes de ácido nucleico: hacia una vacuna educada. Adv Immunol 114, 1-32.
Especificaciones
Número CAS: 31852-29-6
Concentración de trabajo: 30 ng - 10 μg/ml
Solubilidad: 5 mg/ml en agua fisiológica (NaCl 0,9%) calentada durante 10 minutos a 65 - 70°C
Control de calidad:
Espectro de absorbancia
La actividad de TLR3 se ha verificado utilizando células HEK-Blue™ TLR3
La ausencia de contaminación bacteriana (p. ej., lipoproteínas y endotoxinas) se ha confirmado utilizando células HEK-Blue™ TLR2 y HEK‑Blue™ TLR4 .
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Contenido
Poly(I:C) HMW se suministra liofilizado y con agua fisiológica estéril libre de endotoxinas (NaCl 0,9%).
Está disponible en dos cantidades:
10 mg (#tlrl-pic) con 10 ml de agua fisiológica estéril libre de endotoxinas
50 mg (#tlrl-pic-5) con 2 x 25ml de agua fisiológica estéril libre de endotoxinas
Poly(I:C) HMW se envía a temperatura ambiente
Al recibirlo almacenar a 4°C. Tras la resuspensión, prepare alícuotas y guárdelas a -20 °C para almacenamiento a largo plazo. Almacenar a 4°C para almacenamiento a corto plazo.
El producto liofilizado es estable 1 año a 4°C cuando se almacena adecuadamente.
El producto resuspendido es estable 1 mes a 4°C y 1 año a -20°C.
FLA-ST es flagelina aislada de la bacteria Gram-negativa Salmonella typhimurium.
