La solución QUANTI-Blue™ es un ensayo enzimático colorimétrico desarrollado para determinar cualquier actividad de fosfatasa alcalina (AP) en una muestra biológica, como el sobrenadante de cultivo celular. Se ha optimizado para su uso en placas de 96 pocillos (procedimiento estándar) y en placas de 1536 pocillos (procedimiento de cribado de alto rendimiento).
La solución QUANTI-Blue™ se puede utilizar para detectar y cuantificar la actividad AP o SEAP. La fosfatasa alcalina embrionaria secretada (SEAP) , una forma truncada de AP placentario, es un gen informador ampliamente utilizado. SEAP se secreta en el sobrenadante del cultivo celular y, por lo tanto, ofrece muchas ventajas sobre los reporteros intracelulares. InvivoGen proporciona una amplia colección de líneas celulares informadoras con el gen informador SEAP.
Características y ventajas de la solución QUANTI-Blue™:
Un medio conveniente, fácil y rápido para detectar y cuantificar la actividad SEAP y AP
Tiempo práctico corto: < 10 min
Fácil de preparar: simplemente mezcle QB Reagent y QB Buffer con agua
Altamente sensible
Amplio rango dinámico
Umbral de saturación alto
Permite la detección de alto rendimiento (HTS)
En presencia de AP o SEAP, el color de QUANTI-Blue™ cambia de rosa a púrpura/azul. La intensidad del color púrpura/azul refleja la actividad de AP. Los niveles de AP se pueden determinar cualitativamente a simple vista o cuantitativamente utilizando un espectrofotómetro a 620-655 nm.
Cifras
Procedimientos estándar QUANTI-Blue™Procedimientos estándar QUANTI-Blue™
Procedimiento de detección de alto rendimiento (HTS) QUANTI-Blue™Procedimiento de detección de alto rendimiento (HTS) QUANTI-Blue™
Especificaciones
Caracterización fisicoquímica : pH y solubilidad
Caracterización funcional: ensayos celulares utilizando fosfatasa alcalina de células reporteras que expresan SEAP.
Contenido
La solución QUANTI-Blue™ está disponible en tres tamaños de envase:
rep-qbs : 5 x 1 ml de reactivo QB + 5 x 1 ml de tampón QB, suficiente para preparar la solución QUANTI‑Blue™ para placas de 25 x 96 pocillos o placas de 20 x 1536 pocillos
rep-qbs2: 10 x 1 ml de reactivo QB + 10 x 1 ml de tampón QB, suficiente para preparar la solución QUANTI‑Blue™ para placas de 50 x 96 pocillos o placas de 40 x 1536 pocillos
rep-qbs3: 1 x 20 ml de reactivo QB + 1 x 20 ml de tampón QB, suficiente para preparar la solución QUANTI‑Blue™ para placas de 100 x 96 pocillos o placas de 80 x 1536 pocillos
Guarde el reactivo QB y el tampón QB a -20 °C.
La solución QUANTI-Blue™ reconstituida es estable durante 2 semanas a 2-8 °C y durante 2 meses a -20 °C. Mantenga el QUANTI-Blue™ reconstituido protegido de la luz.
Detalles
Procedimientos estándar QUANTI-Blue™
QUANTI-Blue™ Procedimiento estándar 1
1. Prepare la solución QUANTI-Blue™ según las instrucciones de la hoja de datos. Dispense 180 μl de solución QUANTI-Blue™ por pocillo de placa de 96 pocillos.
QUANTI-Blue™ Procedimiento estándar 2
2. Agregue 20 μl de sobrenadante de cultivo de células que expresan SEAP a cada pocillo.
QUANTI-Blue™ Procedimiento estándar 3
3. Después de una incubación de 15 min a 6 horas a 37 °C, mida la densidad óptica (DO) a 620-655 nm con un lector de microplacas
Medio de cultivo celular para la detección de SEAP.
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