Hygromycin B Gold (solution)
    InvivoGen

    Hygromycin B Gold (solution) 1 g (10 x 1 ml)

    Referencia: ant-hg-1
    148,00 €
    Impuestos excluidos

    Higromicina B 1 g (10 x 1 ml) - Invivogen

    Cantidad

    Higromicina B 1 g (10 x 1 ml) - Invivogen

    Higromicina B Gold: una higromicina B ultrapura, endotoxina probada.

    La higromicina B es un antibiótico aminoglucósido producido por Streptomyces hygroscopicus . Mata bacterias, hongos y células eucariotas superiores al inhibir la síntesis de proteínas.

    Se ha informado que interfiere con la translocación y provoca una mala traducción en el ribosoma 70S.

    Resistencia a higromicina B

    La higromicina B se utiliza como agente selectivo en experimentos de genética molecular en una amplia variedad de especies eucariotas y procariotas.

    El gen hph confiere resistencia a la higromicina a las células que lo expresan y muchos vectores que llevan el gen hph están disponibles dentro de la comunidad científica.

    Normalmente, las células de mamíferos son sensibles a concentraciones de higromicina B de 50-200 µg/ml y las bacterias a 50-100 µg/ml.

     

    Protocolo para facilitar la transición del uso de Higromicina B a Higromicina B Gold.

     

    Referencias:

    1. Cabanas M. et al., 1978. Interferencia dual de higromicina B con translocación ribosómica y con reconocimiento de aminoacil-tRNA. EUR. J. Bioquímica. 87:21‑7.
    2. Gonzales, A. et al., 1978. Estudios sobre el modo de acción de la higromicina B, un inhibidor de translocación en eucariotas. Biochem Biophys Acta 521:459‑69.
    3. Gritz L. & Davies J., 1983. Resistencia a higromicina B codificada por plásmido: la secuencia del gen de higromicina B fosfotransferasa y su expresión en Escherichia coli y Saccharomyces cerevisiae. Génesis 25:179-88.
    4. Cullen D. et al., 1987. Transformación de Aspergillus nidulans con el gen de resistencia a la higromicina, hph. Génesis 57:21-6.
    5. Santerre R. et al., 1984. Expresión de genes procarióticos para resistencia a higromicina B y G418 como marcadores de selección dominante en células L de ratón. Génesis 30:147-56.

    Especificaciones

    Concentración del producto:  solución de 100 mg/ml

    Número CAS : 31282-04-9

    Control de calidad: cada lote se prueba minuciosamente para garantizar la ausencia de variaciones entre lotes.

    Pureza: ≥ 90% (HPLC)

    Nivel de endotoxinas : < 0,5 UE/mg

    Caracterización fisicoquímica: pH, apariencia

    Cultivo celular probado: potencia validada en líneas celulares de mamíferos sensibles y resistentes a la higromicina

    No citotoxicidad de contaminantes traza: ausencia de efectos a largo plazo confirmada en células resistentes a la higromicina

    Fórmula: C 20 H 37 N 3 O 13 , HCl

    Peso molecular: 563,5

    Estructura:

    Contenido

    La higromicina B Gold (anteriormente llamada HygroGold™) se suministra como una solución amarilla filtrada estéril a 100 mg/ml en tampón HEPES.

    Este producto está disponible en tres tamaños de envase:

    ·       hormiga-hg-1: 10 x 1 ml (1 g)

    ·       hormiga-hg-2: 20 x 1 ml (2 g) 

    ·       hormiga-hg-5: 1 x 50 ml (5 g)

    Hygromycin B Gold se envía a temperatura ambiente.

    Una vez recibido, debe almacenarse a 4°C o -20°C.

    MANEJO ESPECIAL: La higromicina B es un compuesto peligroso. Evite el contacto con la piel y los ojos.

    Detalles

    CONCENTRACIONES DE TRABAJO

    La higromicina B Gold se usa normalmente a una concentración de 200 μg/ml, una dilución de 500 veces de la solución madre. Sin embargo, es necesario determinar la concentración óptima para sus células.
    Las concentraciones sugeridas de Hygromycin B Gold para la selección en algunos ejemplos de células de mamíferos se enumeran a continuación:

    Línea celular

    Medio

    Higromicina B Gold conc

    Referencias

    B16 (melanocitos de ratón)

    RPMI

    100-200 microgramos/ml

    1, 2

    CHO (células de ovario de hámster chino)

    MEM

    100-500 microgramos/ml

    3-5

    HeLa (células uterinas humanas)

    DMEM

    100-200 microgramos/ml

    6, 7

    HEK293 (células de riñón embrionario humano)

    DMEM

    50-400 microgramos/ml

    8-10

    Raji (linfocitos humanos)

    RPMI

    125-300 microgramos/ml

    11, 12

    THP-1 (monocitos humanos)

    RPMI

    250-400 microgramos/ml

    13, 14

    Referencias:

    1. Neerincx A. et al., 2012. NLRC5 controla la expresión génica del MHC de clase I basal de una manera dependiente del potenciador del MHC. J Immunol. 188(10):4940-50.
    2. Saccheri F. et al., 2010. Las uniones comunicantes inducidas por bacterias en tumores favorecen la presentación cruzada de antígenos y la inmunidad antitumoral. Sci Transl Med. 2(44):44ra57.
    3. Hidmark A. et al., 2012. Vanguardia: TLR13 es un receptor de ARN bacteriano. J Immunol. 189(6):2717-21.
    4. Hennen S. et al., 2013. Descodificación de señalización y función del receptor GPR17 acoplado a proteína G huérfano con un agonista de molécula pequeña. Señal de ciencia. 6(298):ra93.
    5. Raschi E. et al., 2014. β-2-glicoproteína I, lipopolisacárido y TLR4 endotelial: tres jugadores en la teoría de los dos golpes para la trombosis mediada por antifosfolípidos. J Autoinmune. S0896-8411(14)00065-1.
    6. Ravid D. et al., 2010. Un papel para la caveolina 1 en el ensamblaje y la gemación del virus paramixovirus parainfluenza 5. J Virol. 4(19):9749-59.
    7. Hayashi Y. et al., 2014. Mecanismo por el cual una proteína LINE reconoce su ARN de cola 3'. Ácidos Nucleicos Res. 42(16):10605-17.
    8. Bowen WS. et al., 2012. Señalización selectiva dependiente de TRIF por un agonista del receptor 4 tipo Toll sintético. Señal de ciencia. 5(211):ra13.
    9. Leskela TT. et al., 2012. La variante Cys-27 del receptor opioide {delta} humano modula la maduración y el suministro a la superficie celular de la variante Phe-27 mediante heteromerización. J. Biol. Chem., 287: 5008-20.
    10. van den Bosch MW. et al., 2014. LPS induce la degradación de la proteína de muerte celular programada 4 (PDCD4) para liberar Twist2, activando la transcripción de c-Maf para promover la producción de interleucina-10. J Biol Chem. 289(33):22980-90.
    11. Benjamín LR. et al., 2008. Los mecanismos jerárquicos crean la especificidad de unión al ADN de la proteína de unión FUSE. PNAS. 105(47):18296-301.
    12. Bornkamm GW. et al., 2005. Control estricto dependiente de doxiciclina de las actividades génicas utilizando un sistema episomal de un vector. Ácidos Nucleicos Res. 33(16):e137.
    13. Bouwman LI. et al., 2014. Activación del inflamasoma por Campylobacter jejuni. J Immunol. 193(9):4548-57.
    14. Bryan NB. et al., 2009. La activación de los inflamasomas requiere la redistribución intracelular de la proteína tipo mota apoptótica que contiene un dominio de reclutamiento de caspasa. J Immunol. 182(5):3173-82.

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    Preguntas frecuentes

    En la TDS se indica que se puede usar menos Hygromycin B Gold (50-100 µg/ml) en LB bajo en sal, sin embargo, solo tenemos LB alto en sal premezclado en nuestro laboratorio, por lo tanto, ¿qué concentración de Hygromycin B Gold se debe usar para? ¿selección?
    Recomendamos usar Hygromycin B Gold en una concentración entre 100 y 150 µg/ml para condiciones de LB con alto contenido de sal.


    ¿Cuál es el método de almacenamiento preferido para Hygromycin B Gold?
    Hygromycin B Gold se envía a temperatura ambiente. Una vez recibido, se puede almacenar a 4 °C para almacenamiento a corto plazo o -20 °C para almacenamiento a largo plazo.
    Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación. La fecha de caducidad se especifica en la etiqueta del producto.
    Una vez abierto permanece estable durante 1 año a -20°C siempre que se eviten ciclos repetidos de congelación-descongelación, y se puede conservar a 4°C durante 3 meses siempre que se mantenga en condiciones estériles.


    ¿Cuál es la concentración de selección de higromicina B Gold en células de mamífero?
    La concentración de trabajo de Hygromycin B Gold en líneas celulares de mamíferos varía entre 50 y 200 μg/ml, con algunos casos informados de hasta 500 μg/ml. En un experimento inicial, recomendamos determinar la concentración óptima de Hygromycin B Gold requerida para matar su línea de células huésped. Generalmente, Hygromycin B Gold se usa a 200 μg/ml, una dilución de 500 veces de la solución madre.
    Para obtener información más detallada, consulte la ficha técnica de este producto.


    ¿Cuál es la concentración de selección de higromicina B Gold en E. coli ?
    Los transformantes resistentes a higromicina se seleccionan en medio de agar LB bajo en sal suplementado con 50 a 100 µg/ml de Hygromicina B Gold. Las placas que contienen Hygromycin B Gold son estables durante 1 mes cuando se almacenan a 4 °C.

    Detalles del producto