Higromicina B 1 g (10 x 1 ml) - Invivogen

Higromicina B Gold: una higromicina B ultrapura, endotoxina probada.

La higromicina B es un antibiótico aminoglucósido producido por Streptomyces hygroscopicus . Mata bacterias, hongos y células eucariotas superiores al inhibir la síntesis de proteínas.

Se ha informado que interfiere con la translocación y provoca una mala traducción en el ribosoma 70S.

Resistencia a higromicina B

La higromicina B se utiliza como agente selectivo en experimentos de genética molecular en una amplia variedad de especies eucariotas y procariotas.

El gen hph confiere resistencia a la higromicina a las células que lo expresan y muchos vectores que llevan el gen hph están disponibles dentro de la comunidad científica.

Normalmente, las células de mamíferos son sensibles a concentraciones de higromicina B de 50-200 µg/ml y las bacterias a 50-100 µg/ml.

Protocolo para facilitar la transición del uso de Higromicina B a Higromicina B Gold.

Especificaciones

Concentración del producto:  solución de 100 mg/ml

Número CAS : 31282-04-9

Control de calidad: cada lote se prueba minuciosamente para garantizar la ausencia de variaciones entre lotes.

Pureza: ≥ 90% (HPLC)

Nivel de endotoxinas : < 0,5 UE/mg

Caracterización fisicoquímica: pH, apariencia

Cultivo celular probado: potencia validada en líneas celulares de mamíferos sensibles y resistentes a la higromicina

No citotoxicidad de contaminantes traza: ausencia de efectos a largo plazo confirmada en células resistentes a la higromicina

Fórmula: C ₂₀ H ₃₇ N ₃ O ₁₃ , HCl

Peso molecular: 563,5

Contenido

La higromicina B Gold (anteriormente llamada HygroGold™) se suministra como una solución amarilla filtrada estéril a 100 mg/ml en tampón HEPES.

Este producto está disponible en tres tamaños de envase:

·       hormiga-hg-1: 10 x 1 ml (1 g)

·       hormiga-hg-2: 20 x 1 ml (2 g) 

·       hormiga-hg-5: 1 x 50 ml (5 g)

Hygromycin B Gold se envía a temperatura ambiente.

Una vez recibido, debe almacenarse a 4°C o -20°C.

MANEJO ESPECIAL: La higromicina B es un compuesto peligroso. Evite el contacto con la piel y los ojos.

Detalles

CONCENTRACIONES DE TRABAJO

La higromicina B Gold se usa normalmente a una concentración de 200 μg/ml, una dilución de 500 veces de la solución madre. Sin embargo, es necesario determinar la concentración óptima para sus células.
Las concentraciones sugeridas de Hygromycin B Gold para la selección en algunos ejemplos de células de mamíferos se enumeran a continuación:

Preguntas frecuentes

En la TDS se indica que se puede usar menos Hygromycin B Gold (50-100 µg/ml) en LB bajo en sal, sin embargo, solo tenemos LB alto en sal premezclado en nuestro laboratorio, por lo tanto, ¿qué concentración de Hygromycin B Gold se debe usar para? ¿selección?
Recomendamos usar Hygromycin B Gold en una concentración entre 100 y 150 µg/ml para condiciones de LB con alto contenido de sal.

¿Cuál es el método de almacenamiento preferido para Hygromycin B Gold?
Hygromycin B Gold se envía a temperatura ambiente. Una vez recibido, se puede almacenar a 4 °C para almacenamiento a corto plazo o -20 °C para almacenamiento a largo plazo.
Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación. La fecha de caducidad se especifica en la etiqueta del producto.
Una vez abierto permanece estable durante 1 año a -20°C siempre que se eviten ciclos repetidos de congelación-descongelación, y se puede conservar a 4°C durante 3 meses siempre que se mantenga en condiciones estériles.

¿Cuál es la concentración de selección de higromicina B Gold en células de mamífero?
La concentración de trabajo de Hygromycin B Gold en líneas celulares de mamíferos varía entre 50 y 200 μg/ml, con algunos casos informados de hasta 500 μg/ml. En un experimento inicial, recomendamos determinar la concentración óptima de Hygromycin B Gold requerida para matar su línea de células huésped. Generalmente, Hygromycin B Gold se usa a 200 μg/ml, una dilución de 500 veces de la solución madre.
Para obtener información más detallada, consulte la ficha técnica de este producto.

¿Cuál es la concentración de selección de higromicina B Gold en E. coli ?
Los transformantes resistentes a higromicina se seleccionan en medio de agar LB bajo en sal suplementado con 50 a 100 µg/ml de Hygromicina B Gold. Las placas que contienen Hygromycin B Gold son estables durante 1 mes cuando se almacenan a 4 °C.